Uno de los primeros intentos de clasificar las MA fue la de Runyon, basado en las características de las colonias, su pigmentación tras exposición a la luz y la velocidad de crecimiento. (1,3)
Las diferencias entre especies se realiza mediante una serie de reacciones bioquímicas y metabólicas, así como el estudio de su diferente composición lipídica por técnicas de cromatografía. El empleo de métodos radiométricos y de sondas genéticas ha permitido reducir de forma considerable el tiempo necesario para su aislamiento e identificación. (3)(9)
La frecuencia con que se describe el aumento de estas infecciones en los últimos años (1,2,3,4) nos motivó a realizar el presente trabajo con el fin de aportar nuevos elementos sobre la situación de la Micobacteriosis en nuestro medio.

Objetivos


1. Identificar y clasificar las especies de Micobacterias ambientales aisladas de pacientes con diagnóstico de Micobacteriosis.

2. Correlacionar los antecedentes patológicos personales, la edad y el sexo con los casos diagnosticados.

Materiales y Métodos

Se realizó un estudio observacional descriptivo partiendo de la revisión de todas las Fichas Bacteriológicas de los pacientes a los que se les aislaron cepas de MA, en el Laboratorio de Microbiología del Hospital Neumológico “Benéfico Jurídico”, durante los años 1996 hasta el 2005. De todos aquellos casos que tenían 3 ó más aislamientos de la misma especie micobacteriana se investigó, mediante la revisión de las Historias Clínicas, los datos referentes a edad, sexo y antecedentes patológicos personales.

· Se consideró el diagnóstico de Micobacteriosis siempre y cuando los enfermos presentaran síntomas respiratorios (tos, expectoración, disnea, hemoptisis); síntomas generales (pérdida de peso, fiebre, astenia, anorexia); signos de lesiones radiológicas pulmonares y aislamiento en 3 ó más muestras del mismo germen.

La identificación micobacteriana se llevó a cabo en todos los casos mediante los siguientes parámetros: (3,5,6,7,8)
 Examen directo de la muestra mediante Coloración de Ziehl-Neelsen para comprobar sus características morfológicas y tintoriales (BAAR)
 Cultivo en medio de UIT (Lowenstein-Jensen modificado) previo método de descontaminación de las muestras (Petroff)
 Pruebas de identificación a partir del crecimiento bacteriano:
· Características culturales
· Frotis y coloración de Ziehl-Neelsen para confirmar que se trataba de BAAR
· Pruebas de tipaje: niacina y catalasa 68 oC. pH 7.
· Prueba de Fotocromogenicidad
· Determinar la velocidad de crecimiento

· Pruebas Bioquímicas
1. Reducción de nitratos
2. Catalasa semicuantitativa
3. Hidrólisis de Tween (5 días)
4. Reducción de Telurito (3 días)
5. Arilsulfatasa (3 dias)
6. Agar Mac Conkey
7. Ureasa
8. Pirazinamidasa (4 días)

Resultados

Llevada a cabo la revisión de las Fichas Bacteriológicas y de las Historias Clínicas de los pacientes, se detectaron 143 casos con el diagnóstico de Micobacteriosis
De estos 143 enfermos, en 113 de ellos se aislaron Micobacterias del Grupo III de Runyon (no cromógenas), 45 de las cuales fueron posibles identificar como pertenecientes al Complejo avium-intracelular (MAC); 15 se correspondieron a Micobacterias Fotocromógenas (Grupo I de Runyon) y de ellas se identificaron 10 como M. kansasii y 1 como M. simeae.

Hubo 13 casos de Micobacteriosis que correspondieron a Micobacterias de crecimiento rápido (Grupo IV de Runyon), de las cuales fueron posibles identificar 8 como del Complejo fortuitum-chelonae. En 2 enfermos las especies aisladas produciendo Micobacteriosis Pulmonar fueron M. scrofulacium (Escotocromógenas). (tabla 1)
Con relación a los antecedentes patológicos personales, vemos que en 79 de los casos diagnosticados como Micobacteriosis se reportaba que habían padecido de Tuberculosis Pulmonar; 25 tenían historia de Enfermedad Pulmonar Obstructiva Crónica (EPOC) y 19 de Bronquiectasias. El resto de los pacientes presentaban como antecedente de enfermedad, Asma Bronquial (5 casos); Cáncer (3 de pulmón, 1 de mama y 1 de próstata); Cirrosis Hepática (3 casos); Diabetes Mellitus (2 casos) y Epilepsia y Retinosis pigmentaria (1 caso respectivamente). Hubo 20 pacientes con diagnóstico de Micobacteriosis en los que solo se recogía como antecedente importante ser fumador y/o alcohólico. (tabla 2) 
El 72,1% de los enfermos (103) pertenecían al sexo masculino. (tabla 3)
Del total de casos estudiados el 86,1% (123 pacientes) eran mayores de 50 años. (tabla4)

Discusión

La frecuencia con que se describe actualmente el aumento de las infecciones por MA, ha llamado la atención de muchos especialistas. Este aumento se ha relacionado con la disminución progresiva de la infección por Tuberculosis; se ha insinuado que, al producir ésta algún grado de inmunidad cruzada, también protegería contra otras micobacterias. Otro aspecto al que se le acusa es que también ha aumentado el cultivo sistemático de las muestras clínicas, han mejorado los métodos diagnósticos microbiológicos y existe una mayor concientización de la importancia clínica de estas bacterias. (1,4).Sin duda el factor más importante que está asociado en los últimos tiempos ha sido la aparición del SIDA, debido a su aislamiento en forma significativa en estos enfermos. (1,2,3,4,10)

En estudios realizados en España, el aislamiento de las MA se reporta entre un 5 y 15% del total de cepas de Micobacterias.(1) En Estados Unidos su identificación está relacionada fundamentalmente con enfermos de SIDA, llegando a ser un diagnóstico que induce en primera instancia la sospecha de la enfermedad. (2,10,12)
En Cuba se realizó una investigación sobre el aislamiento de cepas de MA por Pedraza y colaboradores en 1971, donde se reportaron 112 cepas en un período de 5 años, pero no se asoció el aislamiento con el diagnóstico de enfermedad..(11). En el presente trabajo se identificaron 143 casos de personas con Micobacteriosis, que se corresponden con el aislamiento de gran cantidad de cepas, ya que cada caso tenía, al menos, 3 muestras con el mismo tipo de micobacteria.

De acuerdo con el resultado de esta investigación, constatamos que hubo un predominio de aislamientos de cepas pertenecientes al Grupo III de Runyon (68 MAC), seguido en frecuencia por los Grupos I y IV (especies M. kansasii y M. fortuitum-chelonae). Estos resultados coinciden con otros estudios realizados tanto en Cuba como por autores internacionales.(1,4,10,11,12,13).

El diagnóstico etiológico de la enfermedad, incluyendo su clasificación en especie, determina no solamente el pronóstico, sino las pautas terapéuticas a seguir, por cuanto el tratamiento está relacionado con el tipo de micobacteria aislada: la quimioterapia es relativamente eficaz para M. kansasii y M. marinum y muy poco para M. aviun-intracelular.(1,2,3,4)

Las MA están ampliamente diseminadas en el ambiente y raramente infectan a humanos inmunocompetentes. Es frecuente su identificación en individuos inmunodeprimidos y pacientes con SIDA. También está descrito que es frecuente en individuos con Enfermedad Pulmonar Obstructiva Crónica.(10)
Incluso por ello se considera que su papel patógeno es limitado: necesita factores predisponentes locales o sistémicos, que favorezcan la invasión y el posterior desarrollo de la enfermedad (1). En este estudio vemos que se aislaron fundamentalmente de pacientes con antecedentes de Tuberculosis, EPOC y Bronquiectasias. También había un número de enfermos donde se recogía como único dato importante ser fumador y/o alcohólico: también factores de riesgo por cuanto facilita en el primer caso la aparición de Bronquitis crónica y enfisema, y en el segundo desnutrición e inmunodeficiencias.(1,2)

Según Rufí Regan(1) ante un varón, mayor de 50 años, con antecedente de tuberculosis, neumoconiosis, bronquiectasias, bronquitis crónica, enfisema o alcoholismo, con características clínico-radiológicas de tuberculosis pulmonar y una prueba de Mantoux negativa o débil, debe sospecharse una Micobacteriosis y debe corroborarse por estudios bacteriológicos. En el presente trabajo hubo coincidencia con los planteamientos anteriores, por cuanto hubo predominio de casos del sexo masculino y de mayores de 50 años.

Conclusiones

1. Se identificaron todas las especies de MA implicadas en los enfermos de Micobacteriosis de los últimos 10 años mediante la clasificación de Runyon, así como mediante una serie de reacciones bioquímicas y metabólicas.
2. El Complejo aviun-intracelular fue, dentro del grupo de MA aisladas, la especie micobacteriana mas asociada con la enfermedad, seguida del M. kansasii y el Complejo fortuitum-chelonae.
3. El antecedente personal de una enfermedad pulmonar como la Tuberculosis, la EPOC, y la Bronquiectasias, constituyó un factor de riesgo predominante en el grupo de pacientes estudiados.
4. Se diagnosticó un mayor número de enfermos con Micobacteriosis del sexo masculino y mayores de 50 años.
5. El aislamiento e identificación de las MA constituye un factor muy importante en el diagnóstico de las Micobacteriosis, así como determina el pronóstico y la posible terapéutica de lo enfermos. 

BIBLIOGRAFÍA

1. G. Rufi Rigan. Infección por Micobacterias No Tuberculosas. Farreras. Rozman. Med. Int. Ed. En CD-ROM, 1995:2367-70
2. OPS. Manual para el Control de las Enfermedades Transmisibles en el Hombre. Public. Cient. Número 564. 1997
3. Howard, B.J. Clinical and Pathogenic. Microbiology. 2nd Ed. 1993:503-528.
4. A. Ortega, J. March Arbos y C. Jiménez Buil. Técnicas Diagnósticas en Neumología: Nuevos aspectos en el Laboratorio de Micobacterias. Centro Nac. de Investigación Clínica y Medicina Preventiva. Inst. Salud Carlos III, Madrid, España. 1992.
5. Programa Nacional de Control de la Tuberculosis. Manual de Normas y Procedimientos. MINSAP. Cuba.1999.
6. Ernest H. Runyon, A. G. Karlson, George P. Kubica y Lawrence G. Wayne. Mycobacterium. Microbiología Clínica. Lennette.1982:198-233.
7. Manuel Casal Román. Microbiología Clínica de las Enfermedades por Micobacterias. Córdoba, España. 1990.
8. OMS. Métodos Básicos del Laboratorio en Bacteriología Clínica. Ginegra,1993
9. T. Yamazaki, R. M. Nakamura: Identification of Mycobacterium intracellulare by a polimerasa chain reaction using species-specific primers. Tubercle and Lung Disease. 1995, (76):330-335.
10. R.Appelberg. Inmune response to atypical mycobacteria. Research in Inmunology. 67th Forum in Inmunology.1996
11. Rafael O. Pedraza, R. Suárez, H. Pérez León. Hallazgos de Micobacterias atípicas en pacientes de un Hospital de Neumotisiología. Bol. Hig. Epid. 1971;9 (1):5-9 
12. S. M. Holland.Therapy of mycobacterial infections. Inmunity to intracellular bacteria. 67th Forum of Inmunology. Research in Inmunology.1996
13. Alvin S. Teirnstein, Beca Baneskar, Paul A. Kirschner, Daniel J. Krillenstein, Bernard Robinson, Ming T. Chuang. Pulmonary Infetions with M. avium-intrcellulare.The Mount Sinai Journal of medicine.1990;57 (4). 

Tabla # 1

MA aisladas en pacientes con diagnóstico de MICOBACTERIOSIS PULMONAR

Tabla # 2

Antecedentes Patológicos Personales de los pacientes con Micobacteriosis

Tabla No. 3

Casos de MICOBACTERIOSIS según sexo

Tabla No. 4

Casos de MICOBACTERIOSIS según edad

Autores: 
Dra. Carmen Rodríguez Acosta
Dr. Jorge Luis Martínez Pérez

Médico Especialista en Microbiología
Máster en Bacteriología-Micología. 
Profesora Auxiliar. Jefe del Laboratorio de Microbiología

Médico Especialista en Epidemiología
Profesor Asistente

Hospital Neumológico "Benéfico Jurídico"
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